RNAclean -kit

A-1 Celllys eller homogenisering är inte tillräcklig

---- Minska provanvändningen, öka mängden lysbuffert, öka homogeniseringen och lystiden.

A-2 Provmängden är för stor

---- Minska mängden prov som används eller öka mängden lysbuffert.

A-1 Otillräcklig celllys eller homogenisering

---- Minska provanvändningen, öka mängden lysbuffert, öka homogeniseringen och lystiden.

A-2 Provmängden är för stor

---- Se maximal bearbetningskapacitet.

A-3 RNA elueras inte helt från kolonnen

---- Efter tillsats av RNase-fritt vatten, låt det stå i några minuter innan du centrifugerar.

A-4 Etanol i elueringsmedlet

---- Efter sköljning, centrifugera igen och ta bort tvättbufferten så mycket som möjligt.

A-5 Cellodlingsmedium avlägsnas inte helt

---- När du samlar in celler, var noga med att ta bort odlingsmediet så mycket som möjligt.

A-6 Cellerna lagrade i RNAstore centrifugeras inte effektivt

---- RNAstore-densitet är större än det genomsnittliga cellodlingsmediet; så bör centrifugalkraften ökas. Det föreslås att centrifugera vid 3000x g.

A-7 Lågt RNA-innehåll och överflöd i provet

---- Använd ett positivt prov för att avgöra om det låga utbytet orsakas av provet.

A-1 Materialet är inte färskt

---- Färsk vävnad bör lagras i flytande kväve omedelbart eller omedelbart sättas i RNAstore-reagenset för att säkerställa extraktionseffekten.

A-2 Provmängden är för stor

---- Minska provmängden.

A-3 RNase contamination

---- Även om bufferten i satsen inte innehåller RNase är det lätt att förorena RNase under extraktionsprocessen och bör hanteras med försiktighet.

A-4 Elektroforesföroreningar

---- Byt ut elektroforesbufferten och se till att förbrukningsvaror och laddningsbuffert är fria från RNas-kontaminering.

A-5 För mycket belastning för elektrofores

---- Minska mängden provbelastning, laddningen av varje brunn bör inte överstiga 2 μg.

A-1 Provmängden är för stor

---- Minska provmängden.

A-2 Vissa prover har högt DNA-innehåll och kan behandlas med DNas.

---- Utför RNas-fri DNas-behandling till den erhållna RNA-lösningen, och RNA kan direkt användas för efterföljande experiment efter behandling, eller kan renas ytterligare med RNA-reningskit.

För glas, bakat vid 150 ° C i 4 timmar. För plastbehållare, nedsänkt i 0,5 M NaOH i 10 minuter, skölj sedan noggrant med RNasfritt vatten och sterilisera sedan för att helt ta bort RNase. De reagenser eller lösningar som används i experimentet, särskilt vatten, måste vara fria från RNas. Använd RNasfritt vatten för alla reagenspreparat (tillsätt vatten till en ren glasflaska, tillsätt DEPC till en slutkoncentration på 0,1% (V/V), skaka över natten och autoklav).